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abfrontier/Cellartis iPSC单细胞克隆DEF-CS培养基试剂盒/Cellartis iPSC单细胞克隆DEF-CS培养基试剂盒，1试剂盒/632642
주문정보
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제품특징
□ 특징
● hES/iPS cell의 single cell cloning 및 CRISPR/Cas9 application 제공
● Single cell cloning을 위한 96 well plate 배양에최적화된 구성
● All-in-one system으로 간편하게 사용가능
Single cell cloning protocol
● Stem Cell Application Protocol: Single-Cell Cloning and Expansion with theCellartis DEF-CS 500 Culture System
□ 제품설명
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™Culture Media Kit (Code Y30021)은 human ES/iPS cell의 monolayer 배양, 균일하고 깨끗한 세포 분화가 가능한 기존 DEF-CS 500 culture system (Code Y30010)의 능력을 기반으로, single cell cloning 능력을 향상시킨 제품이다. 본 제품을 사용하면 고효율의 single cell cloning이가능하며,DEF-CS 500과 같은 장기간 미분화도 가능하여 균일하게 hiPS cell 배양을 할 수 있다.Cellartis® iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle and Single-CellCloning System (Code 632642)는 세포막 유래 nanovesicle의 일종인 Gesicle을 사용하여 Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein (RNP)를 세포에 도입하는 CRISPR/Cas9 Gesicle producer system (Code 632613)과 Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ CultureMedia Kit (Code Y30021)가 포함된 Kit이다 Gesicle을 이용하면 hard to transfect cell line인human iPS 세포에 대해서도 효율적인 Cas9/sgRNA RNP의도입이 가능하며, off target effect를 줄일 수 있다Cellartis® iPSC rCas9 Electroporation andSingle-Cell Cloning System (Code 632643)은 Guide-it™ sgRNA In Vitro TranscriptionKit (Code 632635) 와 electroporation을 사용한 세포내 도입에 최적인 Guide-it™ Recombinant Cas9(Electroporation-Ready) (Code632641) 및 Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ CultureMedia Kit (Code Y30021)가 포함된 kit이다. 기존의 plasmid 도입에 비해 electroporation을 이용한 Cas9/sgRNA RNP의 도입으로 off-target effect를 줄일 수 있으며, Cas9 단백질의 NLS (Nuclear localization sequence)와electroporation에적합한 buffer를 사용하여 고효율의 Cas9/sgRNA RNP 세포내 도입이 가능하다.
□ 적용
● Human iPSC Single-Cell Cloning
● CRISPR/Cas9-mediated gene editing
□ 구성품
Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™Culture Media Kit (Code Y30021)
구성 | 용량 |
CellartisDEF-CS 500 Basal Medium | 500 ml |
CellartisiPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1 | 800 ㎕ x 2 |
CellartisiPSC Single-Cell Cloning DEF-CS additives | 1 set |
DEF-CS GF-1 | 750 ㎕ x 2 |
DEF-CS GF-2 | 500 ㎕ |
DEF-CS GF-3 | 500 ㎕ |
*기존의 DEF-CS 500 culture system (Y30010)과 비교하여, Single Cell cloning을 위해 제품 구성과 조성이 최적화Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle andSingle-Cell Cloning System (Code 632642)
1.Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit(Code Y30021) 위와 같음2.Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Production System (Code 632613)
a. Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Set (Code 632616) | |
Guide-it CRISPR/Cas9 GesiclePackaging Mix 1(green cap)Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Mix 2(yellow cap)A/C Heterodimerizer(500 nM in Ethanol)Protamine Sulfate(4 mg/ml) | 10 vials10 vials50 ㎕200㎕ |
b. pGuide-it-sgRNA1Vector(Linear)(7.5 ng/㎕)c. Guide-it Ligation Components v2 | 20 ㎕ |
DNA Ligation Mighty MixGuide-it Oligo Annealing BufferGuide-it Control Annealed Oligos v2(100 fmol/㎕)Guide-it Sequencing Primer 1(100 pmol/㎕)PCR-Grade Water | 50 ㎕1.5 ml10 ㎕10 ㎕1 ml |
d. StellarCompetent Cells (Code 636763) | |
Stellar Competent Cells(100㎕/tube)SOC Medium(1 ml/tube)pUC19 Vector(0.1 ng/㎕) | 10 tubes10 tubes10 ㎕ |
Cellartis iPSC rCas9 Electroporation andSingle-Cell Cloning System (Code 632643)
1. Cellartis® iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit(Code Y30021) 위와 같음
2. | Guide-itRecombinant Cas9 (Electroporation-Ready) (Code 632641) | |
Guide-itRecombinant Cas9 (Electroporation-Ready) | 100 ㎕ | |
3. | Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code 632635) | |
| a. Guide-it sgRNA InVitro Transcription Componentsv2 | ||
Guide-itScaffold Template (1 ng/㎕)Guide-it In Vitro Transcription BufferRNase FreeWaterGuide-it T7Polymerase Mix (33 U/㎕)PrimeSTAR MaxPremix (2X)RecombinantDNase I (RNase-Free) (5 U/㎕) | 50 ㎕ 350 ㎕ 1 ml150 ㎕ 625 ㎕ 100 ㎕ | |
b. Guide-it IVTRNA Clean-Up Kit（Code632638) | ||
RNase FreeWaterIVT Binding BufferIVT RNA Clean-Up Spin ColumnIVT Wash BufferCollection Tubes (2 ml) | 13 ml 3 ml50회6 ml x 250 회 | |
□ 보관
Cellartis DEF-CS 500 Basal Medium：4℃Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS COAT-1：4℃Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Additives：-20℃Guide-it CRISPR/Cas9 Gesicle Packaging Set：-20℃Guide-it Ligation Components v2：-20℃pGuide-it-sgRNA1 Vector (Linear) ：-20℃Stellar Competent Cells：-80℃Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready) ：-70℃(주의)Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Components v2：-20℃Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit：실온 (주의) 사용 중 동결/융해반복 시, 사용양을 소분하여 저장하는 것을 권장함
