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제품특징
□ 농도 40 U/㎕
□ 형상
20 mM | HEPES-KOH (pH7.5) | |
50 mM | KCl | |
5 mM | DTT | |
50% | Glycerol |
□ 보존 -20℃
□ 제품설명
Recombinant RNase Inhibitor는 돼지 간 유래의 RNase Inhibitor를 대장균 숙주에서 발현, affinity column 등을 이용하여 정제한 재조합 단백질이다.인간 태반이나 돼지 간에서 직접 조제한 RNase inhibitor와 매우 유사한 성질을 가지고 RNase A와 1:1 복합체를 형성하여 ribonuclease 작용에 대해 저해 활성을 나타낸다.이 반응은 가역적이므로, urea 또는 sulfhydryl 시약에 의해 복합체를 해리시킴으로써 ribonuclease 작용이 되살아난다. 이 경우, inhibitor는 비가역적으로 실활되며, 기존의 길항성 저해제(nucleotide류, 무기인산류)와는 달리 단백질이므로 페놀 처리로 반응계에서 간단히 제거할 수 있다. 또한 RNase H활성은 저해하지 않는다.본 제품은 인체 태반 유래와 돼지 간 유래의 RNase inhibitor처럼 사용할 수 있다.
□ 활성의 정의
5 ng의 RNase A 활성을 50% 저해하는 활성을 1 U으로 한다.(RNase A에 의해 Cyclic 2’, 3’- CMP로부터 생성되는 3’-CMP를 정량)
□ 순도
300 U의 RNase Inhibitor와 1㎍의 λDNA-Hind Ⅲ 분해물을 37 ℃, 1시간 반응하여도 DNA의 전기 영동 패턴에 변화가 없다.300 U의 RNase Inhibitor와 1㎍ supercoiled pBR322 DNA를 37 ℃, 1 시간 반응하여도 DNA의 전기 영동 패턴에 변화가
일어나지 않는다.SDS 전기 영동에 의해 분자량 50 kD 부근에 단일밴드로 확인하였다.
□ 용도
cDNA 합성 반응 (Ribonuclease Inhibitor, 0.5 unit/㎕ reaction)In vitro translation (Ribonuclease Inhibitor, 1 unit/㎕ reaction)In vitro transcription with cell-free extract (Ribonuclease Inhibitor, 20 units/㎕ reaction)In vitro transcription with SP6 or T7 RNA polymerase (Ribonuclease Inhibitor, 1 unit/㎕ reaction)Polysome isolation (Ribonuclease Inhibitor, 1,000 units/㎖ reaction)