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제품특징
□ 제품설명
pRI 201 DNA시리즈는 pRI 101시리즈 (Code 3262/3263)보다 더 높은 효율로 형질전환 식물에서 외래유전자를 발현시키기 위해 개량된 vector이다. Cauliflower mosaic virus (CaMV)의 35S protomer 하류에 ADH (AlcoholDehydrogenase) 유전자 유래의5’ 비번역 영역(5’-UTR) (translation enhancer 영역)를 탑재하였다. pRI 101시리즈 DNA를 기본으로
1) 종래의NOS (Nopaline Synthase) 유전자 유래 terminator를 HSP (Heat Shock Protein) 유전자유래 terminator로 바꾸는 것으로, pRI 101시리즈에비해 식물체에서 목적 유전자 산물의 고발현을 기대할 수 있다.
2) 또, HSPterminator 하류의 cloning site (MCS2)에 다른 유전자를 포함한 발현카셋트 (promoter＋enhancer＋목적 유전자+terminator)를 도입하여 하나의 벡터로 복수의 유전자를 형질 전환하는 것이 가능하다.
pRI 201시리즈에는 애기장대 ADH유래 5’-UTR(AtADH 5’-UTR)을 탑재하였다. pRI 201-AN DNA와 벼 ADH 유래 5’-UTR (OsADH 5’-UTR)을 탑재하였다. pRI 201-ON DNA의2종류가 있어 쌍자엽 식물에는 pRI 201-AN DNA, 단자엽 식물에는 pRI 201-ON DNA가적합하다. 또, 형질 전환시의 positive control로서 널리 이용되는 GUS(β-glucuronidase) 유전자를 각각의 벡터에 넣은 control vector (pRI201-AN-GUS DNA,pRI 201-ON-GUS DNA)도 판매하고 있다.
본 제품은 식물 형질 전환용 binary vector pRI 910 DNA (Code 3261)를기본으로 한 binary vector이며, Rhizobiumrhizogenes의Ri핵외 유전자 유래의 변이형 복제 기점 (Ri ori)을 가지고 있다
3) pUC계의 핵 외 유전자와 같은복제 기점 (ColE1 ori)을 가지고 있어, 대장균 내에서높은 copy수를 유지하며 또한, cloning site가식물의 selection marker에 비해 T-DNA의Right Border (RB) 측에 배치되어 있어 목적 유전자가 결여되는 일 없이 안정적으로 식물 염색체에 유전자삽입이 가능하게 되는 등, pRI 910 DNA가 가지는 특징도 보관 유지하고 있다.
※본 벡터는, 국립대학법인 나라 첨단 과학기술 대학원 대학부터 기술 및 시료의 제공을 받고, 다카라 바이오(주)가 제품화했습니다.
□ 용도
Binary vector법에 의해 Rhizobium (Agrobacterium)을매개로 식물 형질 전환을 위한 vector. 애기장대, 토마토, 담배 등의 쌍자엽 식물 (pRI 201-AN DNA, pRI201-AN-GUS DNA를 사용) 또는 벼 등의 단자엽 식물 (pRI 201-ON DNA, pRI 201-ON-GUS DNA를 사용)의형질 전환 및 외래 유전자의 고발현을 실현.
□ 내용 (농도: 각 0.5 μg/μl)
| pRI 201-AN DNA (TaKaRa Code 3264) | 10 μg |
| pRI 201-ON DNA (TaKaRa Code 3265) | 10 μg |
| pRI 201-AN-GUS DNA (TaKaRa Code 3266) | 10 μg |
| pRI 201-ON-GUS DNA (TaKaRa Code3267) | 10 μg |
□ 보존 -20℃
□ 길이
| pRI 201-AN DNA | 10,432 bp |
| pRI 201-ON DNA | 10,475 bp |
| pRI 201-AN-GUS DNA | 12,220 bp |
| pRI 201-ON-GUS DNA | 12,263 bp |
□ pRI 201 DNA 시리즈의 구조
ColE1ori： 대장균 유래 복제 기점 (대장균 유래)Ri ori： Rhizobium유래복제 기점 (Rhizobiumrhizogenes (Agrobacterium rhizogenes)유래)RB, LB： 식물염색체에 삽입되는 T-DNA 의border 서열 (Rhizobiumradiobacter (Agrobaceteriumtumefaciens) 유래)NOS promoter, NOS terminator： 식물체내의 유전자 발현을 위한promoter, terminator (Rhizobiumradiobacter (Agrobaceteriumtumefaciens) 유래)HSP terminator： 식물로의 유전자 발현을 위한 terminator (Arabidopsis thaliana 유래)GUS： β-glucuronidase 유전자 (대장균유래)NPT II： 식물체내의 selection marker 유전자 (대장균 유래)AtADH 5’-UTR, OsADH 5’-UTR： translation enhancer 영역 (Arabidopsis thaliana또는Oryza sativa 유래)35S promoter： 식물체내의 유전자 발현을 위한 promoter (CaMV 유래)NPT III： 대장균 및Rhizobium (Agrobacterium)의 selection marker 유전자 (kanamycin 내성) (Streptococcus faecalis유래)
