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제품특징
□ 농도 : 0.5 mg/ ㎖
□ 보존 : -20℃
□ 제품설명
본 제품은 출아효모 Saccharomyces cerevisiae의 형질전환체로부터 선택마커인 AUR1-C를 함유하는 불필요한 서열을 제거하기 위한 DNA 서열을 갖고있어 간단한 방법으로 마커 제거 클론을 우선적으로 선별할 수 있도록 구축한 shuttle vector 이다.pAUR135에는 형질전환체 선택 마커로서 AUR1-C 유전자와 마커 제거주 선별용의 GAL10 promoter에 연결한 GIN11M86 서열이 포함되어있다.AUR1-C는 실험실 효모, 야생형 효모, 실용형효모 구분없이 S. cerevisiae에 AbA 내성을 부여하는 유전자이다. GIN11M86은 다량 발현하면생육저해를 일으킨다.pAUR135에 의한 형질전환으로 얻어진 AbA 내성 형질전환체를 galactose 배지로 옮기면 GAL10 promoter가 활성화되어 GIN11M86이 다량 발현한다. 이 때 GIN11M86을 함유하는 거의 모든 형질전환체가 생육저해를 일으키나 아주 낮은 빈도로 homologous recombination에 의하여 생긴 AUR1-C 마커 영역이 제거된 주만이우선적으로 생육하게 된다. 여기에는 AbA 감수성의 목적의형질전환체와 원래로 복귀한 주가 포함되어 있다. 따라서 pAUR135는재형질전환에 사용할 수 있다. 또 AUR1-C 마커 뿐만 아니라 vector 서열도 제거되므로 실용효모의 육종에 있어서 불필요한 서열이 남는 불안을 줄일 수 있다. pAUR135는 변이도입이나 유전자기능의 파괴 등에 사용할 수 있다.
□ 길이
6,074 bp
□ 용도
항생물질 Aureobasidin A를 이용한 효모의 형질전환과 마커 제거용 벡터
□ pAUR135 DNA의 구조
그림 pAUR135 DNA 제한효소 맵
AUR1-Cr | S. cerevisiae AbA 내성 유전자 |
GAL10p-GIN11M86 | Galactose 유도성 생육저해 DNA 서열 |
Ampr | E. coli에서의 선택 마커 |
Col E1 ori | E. coli에서의 복제기점 |