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제품특징
□ 제품설명
Taq DNA polymerase (TaKaRa Taq, TaKaRa Ex Taq,TaKaRa LA Taq, SpeedSTAR HS 등)은 합성 산물의 3"말단에dA를 부가하는 성질을 가지고 있어, 이러한 효소를 이용해 증폭된 PCR산물은 TA cloning에 이용할 수 있다. 본 제품은 PCR산물의 간편한 클로닝을 위해서 설계된 벡터로, EcoR V사이트로 절단된 각3"말단에dT가 부가되어 있어, Taq DNA polymerase계열의 효소로 증폭된 PCR산물과 직접 ligation할 수 있다. 또, T-Vector pMD20은 MCS site 상류에SP6 promoter 서열을 가지고 있어, SP6 RNA polymerase를 이용해 클로닝 유전자에 상보적인 single strand RNA의 합성도 가능하다.T-Vector pMD19 (Simple)는 pUC19을 기본으로 설계되어 있지만, pUC19 MCS site가 모두 제거되어 있어 클로닝 후 PCR산물상의 제한 효소 사이트를 이용하는 경우에 유용하다.
□ 품질 검정
본 제품과 control insert를 DNA Ligation Kit Ver. 2.1로 ligation 한 후 E. coli JM109 Competent Cells에 형질 전환했을 경우,> 1×105 cfu/㎍의 콜로니를 얻을 수 있고 그 중 90%이상이 백색 콜로니였고, 백색 콜로니의 90%이상이 목적 insert를 포함하고 있는 것을 colony PCR로 확인하였다.
□ 내용
T-Vector pMD20 또는 T-Vector pMD19 (Simple) (50 ng/μl) | 20 μl |
Control Insert(50 ng/μl)*1 | 10 μl |
*1 3" 말단에dA overhang을 가지는 약500 bp의DNA fragment