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| 선택 | Cat.No. | 제품명 | 가격(VAT별도) | 수량 |
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제품특징
□ 내용
| Extraction Solution 1 | 40 ㎖ |
| Extraction Solution 2 | 8 ㎖ |
| Extraction Solution 3 (100% Benzyl Chloride) | 15 ㎖ |
□ 보존 실온
※ Extraction Solution 2는 저온으로 보존하면 침전물이 생길 수 있다. 침전물이 생겼을 경우는 50℃에서 용해 후, 실온으로 식혀서 사용한다.
□ 제품설명
Plant DNA Isolation Reagent (Code 9194)는 염화벤질법을 기본으로 한 ready-to-use 식물 DNA 추출 Kit이다. 염화벤질은 셀룰로오스 등의 세포벽 성분 중 수산기를 벤질화하여세포벽을 파괴하는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 본 제품은 이런 효과를 이용하는 것으로, 식물샘플을 동결융해 후 피펫 tip의 앞부분으로 몇 차례 튜브 벽에으깨는 것만으로 세포벽을 파괴할 수 있다. 일반적으로 식물에서 핵산 추출에 필요한 액체질소를 이용한분쇄처리를 생략할 수 있기 때문에, 한번에 다수의 샘플을 처리하는 경우에 매우 편리하다. 또한 시약 조성의 최적화로 열처리 시간이 불과 15분 정도밖에 도지않아 수층 회수까지의 소요 시간이 약 30분으로 단축되었다. 회수된게놈 DNA는 PCR, 제한 효소처리 반응에 이용할 수 있다.
□ 비고
본 제품으로 추출한 genome DNA를 주형으로 PCR 하는 경우는 Mighty Amp DNA Polymerase (Code R070A), TaKaRa Ex Taq Hot Start Version (Code RR006A/B)의 사용을 추천한다.
□ 조작 flow
식물 조직을 3mm 이하로 잘라 중량 측정 후, -20℃ 에서 동결한다.(10~100 ㎎의 식물조직/1.5㎖ microtube) ↓동결시킨 식물조직을 실온에서 5분 정도 방치하여 녹인다.↓Spin down 후, 피펫의 tip끝으로 식물조직을 10회 정도 으깬다. ↓ ← Extraction Solution 1 400 ㎕5초간 최대속도로 vortex 한 후 spin down ↓ ← Extraction Solution 2 80 ㎕5초간 최대속도로 vortex 한 후 spin down ↓ ← Extraction Solution 3 150 ㎕5초간 최대속도로 vortex 한 후 spin down ↓50℃, 15분간 incubation ↓ ← 12,000 rpm, 15분, 4℃상등액을 fresh tube로 옮긴다.↓상등액과 동량의 isoproparnol 첨가, 천천히 섞는다. ↓ ← 12,000 rpm, 10분, 4℃상등액 제거후 1㎖의 70% 에탄올로 washing ↓ ← 12,000 rpm, 3분, 4℃ 상등액 제거후, 건조시킨 pellet을 적당량 (약 20 ㎕) 의 TE buffer로 용해한다.
□ 사용상의 주의
Extraction Solution 3의 구성 시약인 염화벤질은 위험물 등급 제4류 인화성액체 제2석유류 위험물등급 II 로 지정되어 있다. 첨부된 Material Safety Data Sheet (MSDS)를 참조하여 취급시 주의한다.
