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| 선택 | Cat.No. | 제품명 | 가격(VAT별도) | 수량 |
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제품특징
□ 내용 (20 회)
| Cloned T4 Polynucleotide Kinase(10 U/㎕) | 20 ㎕ |
| 5× Exchange Reaction Buffer | 100 ㎕ |
| 10× Phosphorylation Buffer | 50 ㎕ |
| Control DNA (λ-BstP I Fragment 0.5 ㎍/㎕) | 20 ㎕ |
□ 보존 -20℃
□ 제품설명
본 제품은 [γ-32P] ATP와 T4 Polynucleotide Kinase를 사용하여 DNA의 5’말단을 표식하는 키트이다. T4 Polynucleotide Kinase의 촉매반응인 인산화 반응, 교환 반응 각각에 TaKaRa 독자의 버퍼를 사용하여 말단 형상에 상관없이 106cpm/ pmol 5’말단 이상의 높은 효율로 표식이 가능하다. 특히 교환 반응에서는 기질의 탈인산-정제등의 전처리 없이 직접 표식반응이 가능하며 106 cpm/pmol 이상의 효율을 얻을 수 있다. 물론 인산화 반응에 의한 합성 DNA, 프라이머, linker 등의 표식 반응에 대해서도 높은 효율의 표식이 가능하다.본 키트를 사용할 때는 [γ-32P] ATP[Perkin Elmer사 Code NEG502A] (111 TBq/ mmol, 3,000 Ci/ mmol) 가 필요하다. 또 5’- P말단 인산화 반응으로 표식할 때는 5’말단 탈인산화 효소인 Alkaline Phosphatase (BAP : TaKaRa Code 2120 또는 CIAP : TaKaRa Code 2250)를 준비하여야 한다.
□ 사용상의 주의
-버퍼는 실온에서 융해할 것. 융해 후 바로 얼음 속으로 옮겨 사용하기 직전에 vortex 등으로 잘 혼합한다.-Reaction buffer를 -20℃에서 보존하면 동결에 의해 백색침전이 발생할수 있으나 표식반응에 영향은 없다.-반응에 사용하는 DNA는 에탄올 침전 등으로 정제한다. 제한효소 반응액을 그대로 사용하면 표식 효율이 떨어지는 경우가 있다.-5 pmol 이상의 DNA(약 1,000 bp 이상)를 표식반응에 사용하면 표식 효율이 106 cpm/ pmol 이하로 저하될 수 있다.-교환반응으로 DNA 단편을 표식하는 경우 수백 bp 이하의 단편은 표식 효율이 저하될 수 있다.
