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abfrontier/MiraCell Endothelial Cells (from ChiPSC12) Kit/MiraCell Endothelial Cells (from ChiPSC12) Kit, 1 Kit/Y50053
주문정보
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제품특징
□ 특징
● 순도 95% 이상의 혈관내피세포 (CD31 positive)
● 혈관내피세포특이적 마커 발현
● 혈관내피세포의기능을 Lot-to-lot variation이 없이 안정적으로 유지
□ 제품설명
MiraCell™ EndothelialCells (from ChiPSC12)은 인간 iPS세포에서 유도한 고순도의 혈관내피세포 (Endothelial Cells)이며 95% 이상의 혈관내피세포 마커 발현율 (CD31 양성률)을 보인다. 본 세포는 제조 롯트의 편차 없이 CD31, Tie2, vWF (Von Willebrand factor), CD144 (VE-cadherin) 등의혈관내피세포의 마커를 발현할 뿐만 아니라 LDL density나Tube formation potential 등의 혈관내피세포의 기능을 유지하고 있다. 이에따라 혈관내피세포의 기능해석이나 제약, 독성 시험, 재생의료연구 등에 폭넓게 이용 가능하다. MiraCell™ EndothelialCells (from ChiPSC12)Kit (Code Y50055)는 frozen vial 상태의 세포와 세포 생장용 배지 MiraCell™EC Culture Medium (Code Y50053)를 제공한다. 본 제품은 교토대학 iPS 세포 연구소에서 연구 및 개발한 인간 혈관내피세포의 제작 기술을 Takara Bio가 iHeart Japan 주식회사로부터 도입하여공동 개발한 제품이다. 본 제품의 제조에 사용된 human iPScell line ChiPSC12(Code Y00285)은 feeder-free 배양조건인 CellartisDEF-CS 500 Culture System(Code Y30010)으로 배양되었다. 
그림 1. MiraCell™과 HUVEC 세포의 혈관내피 마커 발현 비교Lot이 각기 다른2개의 MiraCell™ Endothelial Cell과 HUVEC Cell line의 혈관내피 마커 발현량을분석한 결과, 혈관 내피 세포의 표지로 알려진 CD31, Tie2,vWF의 발현량은 모두 유사한 반면 혈관내피 전구 세포의 마커로 알려진 CD34의 발현량이 HUVEC에 비하여 높게 발현하는 것으로 나타났다.
그림 2. Endothelial Cell 세포 표면 항원의 Flow Cytometry (FCM) 분석 결과 혈관내피세포의 마커 (CD31 [PE-CAM1], CD144[VE-Cadherin])와 혈관내피 전구세포의 마커 (CD34), 백혈구세포의 마커 (CD45)에 대한 발현을 FCM 분석하였다. CD31(+)/CD34(+) 및 CD144(+)/CD45(-)의 세포가 각각 99.8%, 97.8%로다수 존재하고 있음을 확인하였다.
그림 3. In vitro Tube formation assay 결과 MiraCell™Endothelial cell을 내피 세포 증식배지 (Code C-22111)와Matrigel coated plate에서 24시간 배양 후, Tube 형성 능력이 확인 되었다.
그림 4. Dil-Ac-LDL작업 결과Fibronectin coated plate에 세포를 파종하고 배양 후, Dil-Ac-LDL(Red)를 첨가하였다. 이후 5시간 배양 및 세포 고정 후, DAPI 염색 (Blue)을 하였다. 모든 세포에서 LDL Density가 관찰 되었다.
그림 5. CD31항체에 의한 면역 검사 결과MiraCell™Endothelial cell을 CD31 항체로 Immunodetection 및 DAPI 염색 결과 대부분이 CD31을 발현함을 확인하였으며 (왼쪽), 22일 배양 후에도99.45%의 세포가 혈관내피 마커 (CD31, CD144)를 고발현하고 있음을 확인하였다 (오른쪽).
□ 내용
MiraCell™ Endothelial Cells(fromChiPSC12)Kit (Code Y50055)
● MiraCell™ Endothelial Cells(from ChiPSC12)1 vial (> 1.5×106cells)
● MiraCell™ EC Culture Medium *- MiraCell™ EC Culture Medium500ml - MiraCell™ EC Culture Supplement 6.5ml x 2
* MiraCell™ EC Culture Medium (Code Y50053)으로 단품 구입
□ Shipping
- MiraCell™ EndothelialCells(from ChiPSC12): -80℃- MiraCell™ EC Culture Medium: 4℃- MiraCell™ EC Culture Supplement: -20℃
□ Storage
- MiraCell™ Endothelial Cells(from ChiPSC12): 액체 질소 보존 세포를받은 즉시 액체 질소에 보관하세요.액체질소 보관이 불가한 경우 세포를 즉시 융해하여 배양하십시오.- MiraCell™ ECCulture Medium: 4℃, 차광 (동결 불가)- MiraCell™ ECCulture Supplement: -20℃ (재동결 불가) 사용시까지 -20℃ 이하에서 보존하고, 사용 하루 전에 4℃에서 overnight으로 융해하십시오. * MiraCell™ EC CulturedMedium에 MiraCell™ ECCulture Supplement를 첨가한 후에는 4℃ 보존하며, 2주 이내 사용을 권장합니다.
□ 본 제품 이외에 필요한 시약
- Dulbecco"s PBS (Code C-40230)- Dulbecco"s PBS, w/o Ca2＋/Mg2＋(CodeC-40232)- Accumax (Innovative Cell Technologies, Inc, Code #AM105)- 1 mg/ml fibronectin solution
□ 사용 상의 주의
MiraCell™ Endothelial Cells(from ChiPSC12)Kit는 iHeart Japan㈜ 로부터 라이선스를 받고 Takara Bio가 제조, 판매하고 있습니다.
