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abfrontier/Cellartis DEF-CS 500无氙培养基/Cellartis DEF-CS 500无氙GMP级基础培养基（原型），1套/Y30045
주문정보
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제품특징
□ 특징
● 동물·사람 유래 성분 불포함 (Xeno-free)
● 단일 세포 (single cell) 상태로계대 (passaging) 가능
● 미분화 상태에서 장기간 계대 가능 (다기능성, 자가재생, 분화능의 잠재력을 장기간 유지)
● 전임상에서의 사용에 최적
● Lot 간의 차이가 적어 안정적인 iPS 배양이가능
□ 제품설명
본 제품은 동물·사람 유래 성분이 포함되지 않은 chemically defined media이다. Feeder-free 배양조건 하에서 장기간 미분화 상태를 유지한 상태로 효율적인 사람 iPS세포의 계대배양이 가능하다. 높은 증식률을 얻을 수있고, 핵형 (karyotype) 또한 유지된다. 이 시스템은 기존의 DEF-CS 500 배양 시스템처럼 최적의 상태로대량 배양이 가능하다. 이 배양 시스템에서 증식한 세포는 미분화 상태를 유지하여 분화된 세포가 거의검출되지 않으므로, 별도의 분화세포 제거 작업이 필요 없다. 또한단일세포 상태로 배양할 수 있기 때문에iPS세포 클로닝에 이용하거나,계대 시 필요한 콜로니 분산작업에 따른 세포에 미치는 영향을 최소화 할 수 있다.iPS세포, ES세포의 배양 시, 별도의 플레이트 코팅제가 필요하다. 플레이트 코팅제로는 iMatrix-511 (Code T303) 또는 Corning Synthemax II-SC Substrate (Corning, Cat. No. 3535)를 권장한다.항생물질이 포함되지 않은 버전의 제품(Code Y20045), GMP grade 버전(Code Y30071)도 있다.GMP grade 제품은 별도로 배지 첨가제를 필요로 한다.
□ Application
● 전임상에서 사람 iPS세포의 scale-up과 대량 배양
● 신약개발 스크리닝용 조제배지로 사용
● Reprogramming, 분화유도용 배지로 사용
□ 내용
Cellartis DEF-CS 500Xeno-Free Culture Medium w/o antibiotics (Code Y30045) | ||
CellartisDEF-CS 500 Xeno-Free Basal Medium w/o antibiotics | 500 ml | |
CellartisDEF-CS 500 Xeno-Free additives | 1 Set; 배지 첨가제 (CodeY30042) | |
- DEF-CS Xeno-Free Additive 1 | 500 ㎕ | |
- DEF-CS Xeno-Free Additive 2 | 200 ㎕ | |
※ 별도의 플레이트 코팅제가 필요합니다.
권장 플레이트 코팅제 iMatrix-511 (Code T303) Corning Synthemax II-SC Substrate（Corning, Cat. No. 3535）
※Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free GMP Grade Basal Medium(Prototype)(Code Y30071)에는 별도 배지 첨가제가
필요합니다.
□ 수송
Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free Basal Medium：2～8 ℃DEF-CS Xeno-Free Additive 1/Additive 2：－15 ℃ 이하
□ 보존
Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free Basal Mediumw/o Antibiotics : 4℃Cellartis DEF-CS 500 Xeno-Free 3D Spheroidadditives：-15℃ 이하
□ Application data
그림 1. 플레이트 코팅제 2종 Synthemax II, iMatrix-511의 사용 데이터 본 제품을 사용하여 사람 iPS세포를 플레이트 코팅제인 Corning Synthemax II-SCSubstrate (Corning, Cat. No. 3535) 및 iMatrix-511 (제품코드: T303) 상에서 각각 배양하고 doubling time을 비교했더니모두 안정된 높은 성장률을 보였다. 따라서 본 제품에서 배양 시 상기2가지 플레이트 코팅제를 추천한다. (28~30시간 간격으로 10회 이상의 계대를 시행하였다. 2회 실시한 시험간의 평균을 나타낸다.)
그림 2. 미분화 상태에서 장기간 배양 가능 본 제품을 사용하여 사람 iPS세포의 계대를 10회 시행한 뒤, 미분화능 상태가 유지되는 것을 미분화 표지인자인 Oct-4와 SSEA4에 대한 면역염색으로 확인하였다. 플레이트 코팅제는 Corning Synthemax II-SC Substrate (Corning, Cat. No. 3535)를 사용하였다.
그림 3. 장기간 계대 후에도 다분화능 유지 본 제품을 사용하여 사람 iPS세포의 계대를 10회 시행한 뒤, 삼배엽으로의 분화능력이 유지되는 것을 각 배엽 특이적 항체로 면역염색 (중배엽은 ASMA, 외배엽은 βIII-tubulin, 내배엽은 SOX17과 HNF4a로 검출)을실시하여 확인하였다. 아래 그림의 핵 염색은 DAPI를 사용하였다. 배양 시 플레이트 코팅제는 Corning Synthemax II-SCSubstrate (Corning, Cat. No. 3535)를 사용하였다.
