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제품특징
□ 제품설명
GS1-R 배지는 self-renewalground state에서 rat ES(embryonic stem) 세포, EG(embryonic germ) 세포를 유도, 유지 및 증식시키기위해 제조된 화학적 성분이 알려진 무혈청 배지(serum-free media)이다.본 제품에 의해 유지된 rat ES 세포는 생식 계열로 분화 가능하며, 상동 재조합과 게놈 편집 기술을 이용함으로써 유전자 변형 쥐와 녹아웃(Knock-out)쥐를 제작하는 것이 가능하다. 이 제품은 2i supplement가 첨부되어 있으며, 그 안에는 2 종류의 저분자 억제제 (small molecule inhibitor, CHIR99021,PD0325901 = "2i")가 포함되어있다. CHIR99021, PD0325901은각각 GSK3β 또는 ERK / MEK의 분화 유도 신호를억제하고 세포의 생존과 증식을 촉진한다.
□ 내용
● GS1-R media 100 ml
● 2i supplement (DMSO 함유) 100 μl
□ 보존
● GS1-R media: -20 ℃
● 2i supplement: -80 ℃
(융해 후 4 ℃에 보관하고 2 주일 이내에 사용)
□ 배지 조제 방법
1. 2i supplement 100 μl를 실온에서 해동 (5 분 이내) 빠르게 스핀 다운한다.2. 2i supplement 전량을 미리 보온한 배지에 첨가하여 완전히 균일하게 될 때까지 혼합한다. 필터 멸균은 피한다.
□ 본 제품 이외에 필요한 시약
Feeder Cell- Inactivated mouse embryonic fibroblast(2 ~ 4 × 10^4 cells / cm2)를젤라틴 코팅 플라스크에 파종한다.
필요에 따라 LIF 등 STAT3신호를 활성화하는 cytokine을 준비한다.