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제품특징
□ 특징
● pCold TF나 pCold ProS2에서 발현시킨 tag 융합 단백질의 tag 제거에 최적
● 4℃에서 단백질 분해 효소 활성을 나타내기 때문에 목적 단백질을 저온으로 유지하면서 tag를 절단 가능
● Protease 자체가 6×HN tag를 보유하고 있어 절단 후 TALON resin 등으로 제거 가능
□ 제품 설명
HRV 3C Protease는 HumanRhinovirus 14 type 3C Protease를 대장균에서 발현시킨 고순도로 정제된6×HN 융합 단백질이다. 본 효소는 Native 효소와동등한 활성을 갖고 있고 특정 아미노산 서열인 LeuGluValLeuPheGln↓GlyPro를 인식하여절단한다. 단백질의 태그 배열의 절단에 이용할 수 있다. 본효소는 6×HN 융합 단백질로 반응 후, TALON MetalAffinity Resin이나 His60 Ni Superflow Resin과 같은 IMAC(immobilized metal affinity chromatography)에 흡착하기 때문에 반응액에서쉽게 제거할 수 있다. 또한 이 효소는 4℃에서 충분한 활성을나타내기 때문에 목적 단백질의 활성을 저해하지 않고 안정적인 상태에서 절단을 할 수 있다.본 제품에는 반응 컨트롤로 Cleavage Control Fusion Protein이 포함되어있다. Control Protein은 N말단에 6×HN 태그를 갖고 있으며 HRV 3C Protease에 의해 52 kDa의 Trigger Factor와 24 kDa의 GST에 절단되기 때문에 절단 후, SDS-PAGE에서 쉽게 결과를 확인할 수 있다.
□ 내용
HRV 3C Protease(1 U/μl) | 500 U |
Cleavage Control Fusion Protein(1 μg/μl) | 10 μg |
10×HRV 3C Cleavage Buffer | 10 ml |
□ 저장
- 20℃
□ 형상 · 조성
HRV3C Protease Storage Buffer | |
50 mM | Tris-HCl(pH8.0 at 25℃) |
150 mM | NaCl |
1 mM | EDTA |
0.5 mM | THP |
50% | Glycerol |
CleavageControl Fusion Protein Storage Buffer | |
50 mM | Tris-HCl(pH7.5 at 25℃) |
100 mM | NaCl |
10 mM | EDTA |
10×HRV3C Cleavage Buffer | |
500 mM | Tris-HCl(pH7.5 at 25℃) |
1.5 M | NaCl |
□ 활성의 정의
HRV 3C Cleavage Buffer(50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, pH7.5)중에서 100μg의 Cleavage Control Fusion Protein 기질을 4℃, 16시간에 95% 이상 절단하는 활성을 1 U로 한다.