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제품특징
[본 제품은 연구용 시약으로 진단(인체)목적으로사용할 수 없습니다. Multiple detection (triplex)을 위한 제품이므로, 사용전 적용하고자 하는 기기장치(Real Time PCR)와 적용성을 확인해 주세요]
□ 특징
● 식품의약품안전처에서 가이드하는 서열의 primer와 Dual-Labeled Probe를 이용한 One step multiplex Real Time
RT-PCR Kit (GI, GII, IPC)
● 독자적으로 개발한 역전사 효소를 이용하여 역전사 반응 5분에 완료
● Internal Positive Control (IPC)과 Positive Control RNA (GI/GII)를 포함하고 있어, 정확한 반응성 확인 가능
□ 제품설명
노로바이러스는 급성 위장염의 주요한원인 바이러스이며, 감염 후 몇 일의 잠복 기간을 거친 후에 구토, 설사, 복통, 발열 등의 증상을 나타낸다.감염원은 감염자의 배설물이나 노로바이러스를 보유하는 쌍각류(조가비가 두짝인 조개)(굴 등)등으로 추정되고 있다. 노로바이러스는 5개의 Geno-group(I~V)의 유전자군으로 분류할 수 있으며, 사람은 Geno-group I(GI)과 II(GII)에 의해 감염되는 것으로 알려져 있다. TaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Detection Kit (One-Step Multiplex) Ver.1은 식품의약품안전처에서 가이드하는 서열의 GI, GII primer 와 probe를 이용한 One step Real Time PCR kit이다.증폭 반응에 이용하는 반응액에는 Takara에서 독자적으로 개발한 역전사효소인 PrimeScript™ Reverse Transcriptase와 anti-Taq antibody를 이용한 hot-start PCR 효소인 TaKaRa Ex Taq™ HS와 Real Time PCR에 최적화되어 있는 버퍼가 포함되어 있다. 따라서, 비특이적 증폭을 억제하며, 높은 증폭 효율, 높은 검출 감도로 Real Time PCR를 실시할 수 있다. 증폭 산물의 검출에는 FAM (GI), HEX (GII)로 표지된 Dual-Labeled Probe를이용하였으며, 또한 반응성 확인을 위한 InternalPositive Control (IPC) RNA와 Cy5로 표지된 Dual-Labeled Probe 및 primer sets도 포함하고있어, 검출에 대한 정확한 판단이 가능하다.Annealing 조건하에서 Dual-Labeled Probe는 주형 DNA에특이적으로 결합하지만, 형광 (reporter)은 quencher에 의해서 억제된 상태이다. 신장 (extension) 반응시 Taq DNA polymerase가 가지고 있는 5"→ 3" exonuclease 활성에 의해, 주형 DNA에 결합되어 있는 Dual-Labeled Probe가 분해되면 quencher에 의한 억제가 해제되어 형광을 발한다. 이 형광강도를측정하여 증폭산물을 모니터할 수 있다.
□ 내용
| TaKaRa qPCR Norovirus(GI/GII) Detection Kit(One-Step Multiplex) Ver.1 (25 μl 반응시 100회) | |
1. Internal Control RNA(IPC) (1 x 106 copies/μl) *1,2 | 30μl |
2. RNA Positive Control GI/GII *2 | 100 μl |
3. 2X One Step RT-PCR Buffer III*3 | 625 μl x 2 |
4. PrimeScript 1step Enzyme Mix*4 | 100 μl |
5. GI Primer/Probe Mix (FAM) | 100 μl |
6. GII Primer/Probe Mix (HEX) | 100 μl |
7. IPC Primer/Probe Mix (Cy5) | 100 μl |
8. RNase Free dH2O | 1 ml x 3 |
9. EASY Dilution (for Real Time PCR) *5 | 1 ml x 2 |
*1:Dilute 1 x 104 copies/μl before use. *2:Stored at -80℃. *3: dNTP Mixture, Mg2+included. *4: RNase Inhibitorincluded. *5: Used formaking serial dilutions of RNA Positive Control GI/GII.
□ 보존
Control RNA(*2) : - 80 ℃그 외 시약 : -20 ℃
□ 본 제품 이외에 필요한 시약, 기기(주된 것)
[시약]RNA 추출 시약
[기구]* Micropipette - 200 μl, 20 μl, 10 μl* Micropipette 용 filter tip
[기기]Real Time PCR instrument
