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제품특징
□ 특징
● Analysis of diverse small RNA species: small RNA (15 - 150 nt) sequencing library 제작
● Flexible sample inputs: total RNA 또는 enriched small RNA 1 ng - 2ug
● Illumina®-ready sequencing libraries: Illumina® adaptor와 index를 별도의 Ligation 과정없이 SMARTer® 기술로 부착
● Quick, single-tube workflow: 3시간 이내에 sequencing library 제작 가능
□ 제품설명
Small non-coding RNAs (smRNAs) 발견과 분석연구는 유전자 발현의 조절 기작을 연구하는 데 있어 큰 기여를 해왔다. 주로 알려진 small RNAs는 miRNAs, siRNAs, piRNAs, snoRNAs로써 20 - 30 nt의 크기를 가지고 있다. SMARTer® smRNA-SeqKit for Illumina®를 이용하면 소량의 small RNAs (low-inputamounts)부터 고품질의 Illumina®-ready sequencing library를제작 할 수 있다. 본제품은 1ng - 2ug의 total RNA 또는 enriched small RNA sample로부터 SMART-Seq® v4 기술을이용하여 Illumina® sequencing library를 제작한다.SMART technology (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)와 Locked Nucleic Acids (LNAs) 기술이 결합된SMART-Seq® v4 기술을 이용함으로써, 소량의small RNAs로부터 편향성이 아주 적은 (minimal bias) NGS library를제작 가능하다. 
그림 1. Schematic of technology used by the SMARTer® smRNA-SeqKit for Illumina®. SMART technology is used in aligation-free workflow to generate sequencing libraries for Illumina platforms
그림2. Demonstrating the accuracy of the SMARTer approach for small RNA-seq. Sequencing libraries were generated from an equimolar pool of 963synthetic miRNAs (miRXplore Universal Reference) using the SMARTer® smRNA-SeqKit for Illumina® (1 ng input; purple), or a small RNA-seq kit from a differentvendor (Competitor N) employing an adapter ligation method (100 ng input;blue). Following sequencing, mapping, and counting of reads, miRNA expressionlevels (Y axis, log scale) were normalized, resulting in an expected expressionlevel equal to 1 for each miRNA, and a 2-fold cutoff was assigned both aboveand below the expected expression level (indicated by two horizontal lines).For visualization purposes, miRNAs are ranked along the X axis in order ofexpression level.
그림3. Reproducibility of SMARTer® small RNA-seq data. Sequencing libraries were generated in parallel from the indicated inputamounts of human brain total RNA using the SMARTer smRNA-Seq Kit for Illumina,and size selected using the BluePippin system. Following sequencing, dataprocessing, and mapping, expression levels of miRNAs identified for eachlibrary were quantified and plotted on correlation diagrams. Panel A.Correlation of miRNA expression levels for experimental replicates involving 1ng inputs. Panel B. Correlation of miRNA expression levels for 2 μg vs. 1 nginputs.
□ Application
Illumina-ready sequencing library preparation, specifically for small RNAs ranging in size from 15-150 nt
□ 구성품
SMARTer®smRNA-Seq Kit for Illumina ® (Code 635029)
- SMARTersmRNA-Seq Kit for Illumina Components
- Indexing Primer Set HT for Illumina - 12
- SeqAmp™DNA Polymerase
- NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up
